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10-27
病毒载体构建稳定细胞株有什么优势？化学试剂介导的转染方法和电转，整合率低，同时整合位点不稳定，易发生再次丢失的情况，而且整合位点一般都在转录活跃区之外，所以并不是理想的稳定整合工具。另外，整合后的拷贝数是由核内的外源DNA局部浓度，而不是转染时的DNA的量决定，而化学方法在输入质粒载体入核的效率比电转和病毒载体相比要低得多，导致其转染相同细胞所用质粒载体用量要大大高于其它方法，造成入核质粒载体量难以控制，这也解释了为什么化学转染方法和其它两种方比，更倾向于得到串联多拷贝。以上...
10-19
ATCC细胞复苏和培养*手册细胞是我们很多基础研究的基础，那么细胞能否被成功复苏就尤为重要了。美国菌种保藏中心，又称美国模式菌种收集中心(ATCC)，是位于马里兰洲洛克菲勒的一家私营的，非赢利性组织。目前它可以提供各种动植物细胞、标准品、菌株达两万多种。以下是来自ATCC的*说明，小凳子搬起来。01收到细胞的注意事项冻存的ATCC细胞株和杂交瘤细胞株在运送过程中使用干冰保持低温。收到冻存细胞后，可以立即解冻复苏，去除二甲基亚砜（DMSO）后进行细胞培养。如果不立即复苏培养细胞...
9-28
白血病细胞株来告诉你白血病的病因一、辐射损伤电离辐射致白血病作用已在动物实验中得到证实，而对人类的致白血病作用也从以下的事实得到提示：早期不加防护的放射线工作者，其白血病发病率比一般医生高8－9倍；强直性脊柱炎的患者采用放射性治疗者，白血病发病率比一般人高10倍，日本的广岛和长畸原子弹爆炸后，遭受辐射地区与末遭辐射地区的居民之间的白血病发病率相差30倍。二、化学因素已知很多化学物质有致白血病作用，如工业中广泛应用的苯。药物中的抗癌剂（尤以烷化剂）、乙双吗啉、氯霉素、保泰松、安...
9-26
我国在肿瘤光动力治疗方面有重大进展耐药是导致肿瘤患者化疗失败的主要原因，是攻克癌症的一项重大挑战。光动力治疗（photodynamictherapy，PDT）可以利用光激发卟啉等光敏剂产生活性氧杀死肿瘤细胞，创伤小、毒性小、恢复快、可保护容貌，并且可利用光动力荧光诊断检测早期癌或癌前病变，具有无创、快速、客观等特点。但是，单一的光动力治疗后，肿瘤容易复发。在国家重点研发计划纳米科技重点专项项目“基于纳米分子影像探针的癌症微创介入诊疗导航技术”的支持下，北京大学工学院戴志飞教授...
8-29
微生物菌种保存方法之载体保存法即将微生物吸附在适当载体上进行干燥保存的方法。常用的有方法包括以下几种，如：①土壤保存法：主要用于能形成孢子或孢囊的微生物菌种的保藏。方法是在灭菌的土壤中加入菌液，立即在室温下进行干燥或使菌体繁殖后再干燥，然后冷藏或在室温下密封保存。保存用的土壤原则上以肥沃的耕土为宜，土壤需风干、粉碎、过筛和灭菌。使微生物在土壤中繁殖后进行干燥保存的方法是：取适量土壤(5克)，置于塞有棉塞的试管中，加水或加入充分稀释的液体培养基(以含水量为土壤大持水量的60%为...
8-22
细胞复苏冻存注意事项冻存和复苏的原则：慢冻快融当细胞冷到零度以下，可以产生以下变化：细胞器脱水，细胞中可溶性物质浓度升高，并在细胞内形成冰晶。如果缓慢冷冻，可使细胞逐步脱水，细胞内不致产生大的冰晶；相反，结晶就大，大结晶会造成细胞膜、纲胞器的损伤和破裂。复苏过程应快融，目的是防止小冰晶形成大冰晶，即冰晶的重结晶。慢冻程序1.标准程序：采用细胞冻存器当温度在-25℃以上时，1~2℃/min；当温度达-25℃以下时，5~10℃/min；当温度达-100℃时，可迅速放入液氮中。2....
4-20
菌种保存有哪些注意事项从事菌种工作方面的朋友们一定知道，关于菌种的保藏是一件十分复杂的事情。那么究竟如何获得的菌种保存效果呢?主要注意的有三个方面。*就是菌种在保存之前的状态。绝大多数的菌种，保存的都应该十它的休眠体，比如说孢子或者是芽孢。而且用来保存的孢子或者是芽孢，应该采用的是新鲜的斜面上生长的非常丰满的培养物。而菌种培养的时间和温度都会影响到菌种的保存质量。如果说培养时间太短，那么保存的时候就容易死亡。而培养的时间如果太长，又容易使菌种的生产性能发生衰退。一般来说，温度...
4-20
人前列腺癌细胞；LNCaP特征特性该细胞由HoroszewiczJS于1977年从一名50岁的明确诊断为转移性前列腺癌的白人男性患者的左锁骨上淋巴结细针穿刺的活体组织中分离建立的。5-α-双氢睾酮可影响该细胞的生长和酸性磷酸酶的产生。该细胞不形成均一的单层而是成簇生长，所以传代的时候要反复吹打形成单个细胞；该细胞贴壁不牢，达不到汇合状态，而且会使培养基迅速变酸；传代后48h内一定要保持培养瓶静止.如果此时挪动培养瓶，会使大部分细胞从瓶底脱落。如果出现此种情况，需要重新孵育24...
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